¿Qué es el estudio citogenético?
El análisis citogenético (o mapa cromosómico o cariotipo) es el estudio de los cromosomas de las células. Los cromosomas contienen los genes que están compuestos por el ADN, la molécula que contiene toda la información necesaria para la «construcción» del individuo y el funcionamiento del organismo.
Hay 46 cromosomas en las células humanas: 23 cromosomas provienen del padre con el espermatozoide y 23 de la madre con el óvulo. Los espermatozoides y los óvulos son células germinales y son las únicas que contienen solo 23 cromosomas. Si el espermatozoide lleva el cromosoma X, nacerá una niña, si lleva el cromosoma Y, nacerá un niño. Por lo tanto, el cariotipo de una mujer normal será 46,XX, mientras que el de un hombre será 46,XY. Para estudiar los cromosomas es necesario utilizar técnicas de cultivo ya que solo se pueden visualizar durante la división celular.
¿Para qué sirve?
El estudio citogenético sirve para verificar que no existen alteraciones en el número y/o estructura de los cromosomas que puedan ser responsables de enfermedades caracterizadas por retraso mental (por ejemplo, síndrome de Down), infertilidad/esterilidad (por ejemplo, síndromes de Turner y Klinefelter), psicomotor y retraso del lenguaje, crecimiento y desarrollo. El aborto precoz repetido también puede ser el resultado de un error cromosómico en uno de los padres (3-5% de los casos).
¿Cuándo conviene realizar el estudio citogenético?
- Citogenética prenatal
Se realiza en embarazos en los que existe mayor riesgo de anomalías cromosómicas del feto: edad materna igual o superior a 35 años (concluidos antes del nacimiento del niño), niño afectado por un error en el número de cromosomas, padres con reordenamientos estructurales que muestran signos clínicos, padres con errores en el número de cromosomas sexuales (ej.: 47,XXX; 47,XXY), anomalías fetales resaltadas en ecografía, indicaciones derivadas de pruebas bioquímicas (ej.: bi-test), repetidos abortos espontáneos. Mediante muestreo transabdominal, la CVS se puede realizar durante el primer trimestre del embarazo (9-12 semanas) o una amniocentesis durante el segundo trimestre (15-18 semanas).
- Citogenética posnatal
El estudio de cariotipo se realiza en pacientes con sospecha de síndrome cromosómico, padres y familiares de sujetos con anomalías cromosómicas, padres de sujetos malformados o con sospecha de síndrome cromosómico que fallecieron sin diagnóstico, si se encuentra retraso mental y/o defectos congénitos , retraso del crecimiento, mortinatos, parejas con abortos espontáneos repetidos, infertilidad masculina, mujeres con amenorrea primaria o secundaria (ausencia o interrupción del ciclo menstrual).
- Citogenética en material abortivo
Alrededor del 15-20% de todos los embarazos reconocidos resultan en un aborto espontáneo y más del 50% tienen un número y/o estructura alterada de los cromosomas que provoca la terminación del embarazo. El estudio citogenético de los tejidos abortados es, por tanto, de fundamental importancia para comprender la causa de la interrupción del embarazo y apoyar a la pareja (ya que en la mayoría de los casos el error cromosómico es puramente aleatorio y no implica un mayor riesgo de que el evento se repita). .
- Citogenética de tumores
El análisis citogenético también se puede realizar para estudiar tumores, tanto hematológicos (p. ej., leucemia) como sólidos (p. ej., de pulmón, mama, hígado, vejiga). Determinados reordenamientos cromosómicos son «tumores específicos» y por tanto permiten un correcto diagnóstico ante la sospecha o duda clínica. Por ejemplo, el hallazgo del cromosoma Filadelfia en un aspirado de médula ósea de un paciente con sospecha de leucemia permite el diagnóstico de leucemia mieloide crónica; o la presencia de la translocación t(X;18) en un cultivo celular preparado a partir de una biopsia de tumor sólido permite el diagnóstico de Sarcoma Sinovial.
Nuevas tecnologías: Hibridación fluorescente in situ (FISH)
El desarrollo de técnicas sofisticadas definidas como «Citogenética Molecular», como la Hibridación Fluorescente In Situ (FISH), permite realizar estudios citogenéticos más profundos ya que permite localizar una secuencia de ADN específica en preparaciones fijas de cromosomas, núcleos interfases y cortes de tejidos, obtenidos a partir de cualquier tipo de material biológico (sangre, biopsias, líquido amniótico, gametos), ya sean frescos, criopreservados o parafinados. La técnica FISH se basa en la propiedad del ADN de desnaturalizarse de forma reversible (apertura de la doble hélice) y consiste en el enlace entre un fragmento de ADN específico para la región de interés -marcado con compuestos fluorescentes (sonda)- y la secuencia de ADN complementaria de la preparación que ha sido fijada y montada en un portaobjetos:
FISH representa un complemento indispensable a la citogenética tradicional ya que se caracteriza por un mayor poder de resolución: de hecho, permite caracterizar anomalías cromosómicas en número y estructura que no se pueden definir mediante técnicas citogenéticas clásicas e identificar reordenamientos crípticos, no visibles incluso después del bandeo. alta resolución. FISH no se aplica de forma rutinaria al análisis de cariotipo, sino solo en casos seleccionados sobre la base de sospechas diagnósticas específicas o para investigar ciertas anomalías citogenéticas.
Una de las aplicaciones más recientes es en el campo oncológico: de hecho, en muchos casos, especialmente para cultivos de tumores sólidos, no se obtiene el crecimiento y la división celular, por lo que los cromosomas no se pueden resaltar y analizar. Además, el nivel de resolución del estudio realizado con citogenética tradicional no permite identificar anomalías que puedan afectar a un solo gen.
Desde el año 2000 se han desarrollado sondas de ADN capaces de reconocer anomalías específicas, por ejemplo el cáncer de vejiga para lo cual se utilizan cuatro sondas que reconocen los cromosomas 3, 7, 17 y nueve marcadas con diferentes fluorocromos (Multicolor FISH).
FISH también puede proporcionar información sobre la terapia más adecuada para un determinado tipo de tumor en un paciente determinado (Terapia Dirigida). Por ejemplo, se sabe que los pacientes con cáncer de mama que tienen un FISH positivo para la amplificación de un gen llamado HER-2/neu, cuya proteína está expuesta en la membrana celular del tumor, responden a la terapia con un fármaco en particular, el trastuzumab. .un anticuerpo que se une al receptor y lo neutraliza (inmunoterapia). La prueba se llama PATHVYSION® y está aprobada por la FDA. FISH también se puede utilizar para estudiar la amplificación de otro gen llamado EGFR, en cáncer de pulmón y colon. También en este caso se pueden utilizar diferentes fármacos dependiendo de si la amplificación del gen se encuentra o no en el tumor del paciente.
Nuevas fronteras se abren con la aplicación de FISH también para otros tipos de tumores como el melanoma, donde el diagnóstico diferencial con nevus displásico es particularmente difícil si se basa únicamente en criterios morfológicos.